建立时间：2023年10月
依托课程：生物工程大型实验
课程目标：
1.掌握蛋白质纯化的基本原理和实验步骤。
2.了解包涵体蛋白的特殊性。
3.掌握包涵体蛋白变性和复性过程中的关键因素和实验操作。
4.熟悉FPLC纯化蛋白的实验操作过程。
主要内容：
《包涵体蛋白的变复性和FPLC纯化虚拟仿真实验》是依托于东华大学生物与医学工程学院建设的一门虚拟仿真实验课程，主要应用于包括生物工程专业在内的生物学相关专业课程体系的重要实践教学环节,对于学生了解生物分离工程实验,掌握蛋白质纯化方面的基本原理和实验步骤具有重要支撑作用。
本虚拟仿真实验内容包括：包涵体蛋白质的表达、缓冲溶液的配制、包涵体蛋白的变性、包涵体蛋白的复性、包涵体蛋白的纯化，共计5个模块。
模块一：包涵体蛋白质的表达
从已转化好蛋白质粒的培养板上选取单克隆，在培养基中进行培养，并转接到2L的含有卡那霉素的LB培养基中。测量菌液OD值，达到0.6后，加入诱导剂诱导蛋白质表达。多次离心菌液，留下菌体。学生跟随虚拟实验步骤指导进行相关操作，掌握包涵体蛋白质表达的操作流程，并对重点知识点熟练掌握。
模块二：缓冲溶液的配制
依次配制好BufferA溶液、包涵体洗涤液、变性缓冲液、复性缓冲液，并进行溶液配制相关内容考核测试。此模块需要学生准确掌握不同缓冲溶液的配方中的关键成分。
模块三：包涵体蛋白的变性
在上述制备好的菌体中加入Buffer A，重悬菌体。继续加入溶菌酶培养。之后进行超声破碎并离心收集沉淀。将收集的沉淀用包涵体洗涤液完全重悬混匀，继续离心并收集沉淀。再次用尿素缓冲液将沉淀重悬，搅拌溶解。离心后收集上清，即为蛋白原始液。学生在操作该模块过程中，了解蛋白质变性过程中需要的相关缓冲溶液，对生物工程及其交叉学科中蛋白变性的应用有更深刻的理解。
模块四：包涵体蛋白的复性
将复性缓冲体系在 4 ℃预冷后置于冰上，低速搅拌。1:100 往缓冲液中缓慢滴加蛋白原始液。加入终浓度1 mM PMSF，搅拌复性缓冲液 15 h。该模块主要让学生学习蛋白复性的相关操作流程，熟练掌握并能够应用于日常实验操作过程中。
模块五：包涵体蛋白的纯化
本模块实验主要用到仪器为蛋白纯化仪，其操作如下：仪器开机，双击电脑桌面图标，进入操作界面。准备流动相和样品：所有的工作溶液和样品必须经过0.45 um 的滤膜过滤。清洗管道，等待柱子平衡好后准备上样，此时需要将紫外调零。将A泵的A1放入样品管中，A2保留在Buffer A 中。选择镍柱纯化程序，进行流速、平衡体积、上样流速、上样体积、线性洗脱等参数编辑。保存编辑好后的纯化程序，并运行，观察各个曲线走势，以及样品收集情况。清洗系统拆柱，并系统给柱子一个慢流速，设置系统保护压力。将柱子拆卸并复原，仪器关机复原，实验台整理完毕，实验结束。此模块中涉及到蛋白纯化仪等大型仪器，学生在日常实验学习过程中，很难接触及学习到仪器的详细操作流程，通过本模块，学生可以学习并操作复杂大型的仪器设备，获得更直观的学习体验。
本虚拟仿真实验的建设，是东华大学《生物工程大型实验》课程教学改革中重要的一环。通过虚拟操作，学生可以对复杂的蛋白纯化实验进行初步掌握，不仅可以实现对生物工程及相关交叉领域的学生实验操作技能和实践能力的培养，也极大的补充和拓展了实验教学和理论教学过程，为学生日后科研活动打下坚实基础，激发学生对实验操作和科研的兴趣，同时也为上海市重点课程《生物分离工程》理论课提供了生动实例。
进入方式：
手机app：MLabs Pro—生物化学实验—包涵体蛋白的变复性和FPLC纯化虚拟仿真实验
网页版：https://www.mools.net/lims/web/DeclarationWebsite_v2/#/?School_id=MTU5MTc3
项目级别：校级虚拟仿真项目、校级一流课程
建立时间：2023年10月
依托课程：生物工程大型实验
课程目标：
1.掌握蛋白质纯化的基本原理和实验步骤。
2.了解包涵体蛋白的特殊性。
3.掌握包涵体蛋白变性和复性过程中的关键因素和实验操作。
4.熟悉FPLC纯化蛋白的实验操作过程。
主要内容：
《包涵体蛋白的变复性和FPLC纯化虚拟仿真实验》是依托于东华大学生物与医学工程学院建设的一门虚拟仿真实验课程，主要应用于包括生物工程专业在内的生物学相关专业课程体系的重要实践教学环节,对于学生了解生物分离工程实验,掌握蛋白质纯化方面的基本原理和实验步骤具有重要支撑作用。
本虚拟仿真实验内容包括：包涵体蛋白质的表达、缓冲溶液的配制、包涵体蛋白的变性、包涵体蛋白的复性、包涵体蛋白的纯化，共计5个模块。
模块一：包涵体蛋白质的表达
从已转化好蛋白质粒的培养板上选取单克隆，在培养基中进行培养，并转接到2L的含有卡那霉素的LB培养基中。测量菌液OD值，达到0.6后，加入诱导剂诱导蛋白质表达。多次离心菌液，留下菌体。学生跟随虚拟实验步骤指导进行相关操作，掌握包涵体蛋白质表达的操作流程，并对重点知识点熟练掌握。
模块二：缓冲溶液的配制
依次配制好BufferA溶液、包涵体洗涤液、变性缓冲液、复性缓冲液，并进行溶液配制相关内容考核测试。此模块需要学生准确掌握不同缓冲溶液的配方中的关键成分。
模块三：包涵体蛋白的变性
在上述制备好的菌体中加入Buffer A，重悬菌体。继续加入溶菌酶培养。之后进行超声破碎并离心收集沉淀。将收集的沉淀用包涵体洗涤液完全重悬混匀，继续离心并收集沉淀。再次用尿素缓冲液将沉淀重悬，搅拌溶解。离心后收集上清，即为蛋白原始液。学生在操作该模块过程中，了解蛋白质变性过程中需要的相关缓冲溶液，对生物工程及其交叉学科中蛋白变性的应用有更深刻的理解。
模块四：包涵体蛋白的复性
将复性缓冲体系在 4 ℃预冷后置于冰上，低速搅拌。1:100 往缓冲液中缓慢滴加蛋白原始液。加入终浓度1 mM PMSF，搅拌复性缓冲液 15 h。该模块主要让学生学习蛋白复性的相关操作流程，熟练掌握并能够应用于日常实验操作过程中。
模块五：包涵体蛋白的纯化
本模块实验主要用到仪器为蛋白纯化仪，其操作如下：仪器开机，双击电脑桌面图标，进入操作界面。准备流动相和样品：所有的工作溶液和样品必须经过0.45 um 的滤膜过滤。清洗管道，等待柱子平衡好后准备上样，此时需要将紫外调零。将A泵的A1放入样品管中，A2保留在Buffer A 中。选择镍柱纯化程序，进行流速、平衡体积、上样流速、上样体积、线性洗脱等参数编辑。保存编辑好后的纯化程序，并运行，观察各个曲线走势，以及样品收集情况。清洗系统拆柱，并系统给柱子一个慢流速，设置系统保护压力。将柱子拆卸并复原，仪器关机复原，实验台整理完毕，实验结束。此模块中涉及到蛋白纯化仪等大型仪器，学生在日常实验学习过程中，很难接触及学习到仪器的详细操作流程，通过本模块，学生可以学习并操作复杂大型的仪器设备，获得更直观的学习体验。
本虚拟仿真实验的建设，是东华大学《生物工程大型实验》课程教学改革中重要的一环。通过虚拟操作，学生可以对复杂的蛋白纯化实验进行初步掌握，不仅可以实现对生物工程及相关交叉领域的学生实验操作技能和实践能力的培养，也极大的补充和拓展了实验教学和理论教学过程，为学生日后科研活动打下坚实基础，激发学生对实验操作和科研的兴趣，同时也为上海市重点课程《生物分离工程》理论课提供了生动实例。
进入方式：
手机app：MLabs Pro—生物化学实验—包涵体蛋白的变复性和FPLC纯化虚拟仿真实验
网页版：https://www.mools.net/lims/web/DeclarationWebsite_v2/#/?School_id=MTU5MTc3
项目级别：校级虚拟仿真项目、校级一流课程
建立时间：2023年10月
依托课程：生物工程大型实验
课程目标：
1.掌握蛋白质纯化的基本原理和实验步骤。
2.了解包涵体蛋白的特殊性。
3.掌握包涵体蛋白变性和复性过程中的关键因素和实验操作。
4.熟悉FPLC纯化蛋白的实验操作过程。
主要内容：
《包涵体蛋白的变复性和FPLC纯化虚拟仿真实验》是依托于东华大学生物与医学工程学院建设的一门虚拟仿真实验课程，主要应用于包括生物工程专业在内的生物学相关专业课程体系的重要实践教学环节,对于学生了解生物分离工程实验,掌握蛋白质纯化方面的基本原理和实验步骤具有重要支撑作用。
本虚拟仿真实验内容包括：包涵体蛋白质的表达、缓冲溶液的配制、包涵体蛋白的变性、包涵体蛋白的复性、包涵体蛋白的纯化，共计5个模块。
模块一：包涵体蛋白质的表达
从已转化好蛋白质粒的培养板上选取单克隆，在培养基中进行培养，并转接到2L的含有卡那霉素的LB培养基中。测量菌液OD值，达到0.6后，加入诱导剂诱导蛋白质表达。多次离心菌液，留下菌体。学生跟随虚拟实验步骤指导进行相关操作，掌握包涵体蛋白质表达的操作流程，并对重点知识点熟练掌握。
模块二：缓冲溶液的配制
依次配制好BufferA溶液、包涵体洗涤液、变性缓冲液、复性缓冲液，并进行溶液配制相关内容考核测试。此模块需要学生准确掌握不同缓冲溶液的配方中的关键成分。
模块三：包涵体蛋白的变性
在上述制备好的菌体中加入Buffer A，重悬菌体。继续加入溶菌酶培养。之后进行超声破碎并离心收集沉淀。将收集的沉淀用包涵体洗涤液完全重悬混匀，继续离心并收集沉淀。再次用尿素缓冲液将沉淀重悬，搅拌溶解。离心后收集上清，即为蛋白原始液。学生在操作该模块过程中，了解蛋白质变性过程中需要的相关缓冲溶液，对生物工程及其交叉学科中蛋白变性的应用有更深刻的理解。
模块四：包涵体蛋白的复性
将复性缓冲体系在 4 ℃预冷后置于冰上，低速搅拌。1:100 往缓冲液中缓慢滴加蛋白原始液。加入终浓度1 mM PMSF，搅拌复性缓冲液 15 h。该模块主要让学生学习蛋白复性的相关操作流程，熟练掌握并能够应用于日常实验操作过程中。
模块五：包涵体蛋白的纯化
本模块实验主要用到仪器为蛋白纯化仪，其操作如下：仪器开机，双击电脑桌面图标，进入操作界面。准备流动相和样品：所有的工作溶液和样品必须经过0.45 um 的滤膜过滤。清洗管道，等待柱子平衡好后准备上样，此时需要将紫外调零。将A泵的A1放入样品管中，A2保留在Buffer A 中。选择镍柱纯化程序，进行流速、平衡体积、上样流速、上样体积、线性洗脱等参数编辑。保存编辑好后的纯化程序，并运行，观察各个曲线走势，以及样品收集情况。清洗系统拆柱，并系统给柱子一个慢流速，设置系统保护压力。将柱子拆卸并复原，仪器关机复原，实验台整理完毕，实验结束。此模块中涉及到蛋白纯化仪等大型仪器，学生在日常实验学习过程中，很难接触及学习到仪器的详细操作流程，通过本模块，学生可以学习并操作复杂大型的仪器设备，获得更直观的学习体验。
本虚拟仿真实验的建设，是东华大学《生物工程大型实验》课程教学改革中重要的一环。通过虚拟操作，学生可以对复杂的蛋白纯化实验进行初步掌握，不仅可以实现对生物工程及相关交叉领域的学生实验操作技能和实践能力的培养，也极大的补充和拓展了实验教学和理论教学过程，为学生日后科研活动打下坚实基础，激发学生对实验操作和科研的兴趣，同时也为上海市重点课程《生物分离工程》理论课提供了生动实例。
进入方式：
手机app：MLabs Pro—生物化学实验—包涵体蛋白的变复性和FPLC纯化虚拟仿真实验
网页版：https://www.mools.net/lims/web/DeclarationWebsite_v2/#/?School_id=MTU5MTc3
项目级别：校级虚拟仿真项目、校级一流课程
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